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魚血離心轉(zhuǎn)速及溫度控制注意事項(xiàng)

2018/5/16 19:43:30??????點(diǎn)擊:

1、血清:現(xiàn)在的很多文獻(xiàn)都寫的4度下靜置(1到數(shù)小時(shí)都可以,甚至有人寫過夜),然后4度下3000或3500 r/min,10或15min.見過最少的寫1500 r/min,最多的寫5000r/min.但這只是寫……實(shí)際情況未必是這樣.


先說靜置,4度下靜置要好久才析出一點(diǎn)血清,很不實(shí)惠.其實(shí)室溫下放1、2個(gè)小時(shí),大部分酶都不會(huì)失活,而且出血清很快.一些經(jīng)典老教材上甚至寫著,冬天室溫低,可以在37度水浴中放置到血清析出.所以我覺得,4度下靜置有點(diǎn)多此一舉.


再說靜置后的離心,如果您用的是玻璃離心管或者放免管(內(nèi)壁一定要干凈),那么按照文獻(xiàn)中的轉(zhuǎn)速和時(shí)間離心可以.但是現(xiàn)在大多數(shù)時(shí)候都用塑料離心管,如果還用3000—4000的轉(zhuǎn)速,所得血清經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)果凍狀的東西,常溫化不開,不能用了.所以,如果用塑料管離心,建議慢一些,4度下1500、1000都可以,離30—60min,可有效避免上述情況.


2、血漿:采的時(shí)候加抗凝劑.現(xiàn)在的文獻(xiàn)上也寫的是3000、3500、4000離心10或15分鐘.當(dāng)然這個(gè)不需要靜置.其實(shí)血漿就是把抗凝血里面的血細(xì)胞沉降出來就行了,您可以用2000或2500離心15分鐘看看,效果是一樣的.


3、全血:當(dāng)然不需要離心了……


另:1、以上說法只能針對魚,別的動(dòng)物我不懂.2、只針對血液生理生化指標(biāo),做基因的我也不懂……3、做是做,寫是寫.您寫文章的時(shí)候還是得按文獻(xiàn)來.

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