為了從細(xì)胞混合物中分離出特殊類型的細(xì)胞，首先應(yīng)該選擇能夠區(qū)分所需細(xì)胞與其它細(xì)胞的方法，根據(jù)分離后回收的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)和細(xì)胞活性評價細(xì)胞分離步驟的有效性。細(xì)胞分離過程一般分步進(jìn)行。
第一步，粗分離。由于細(xì)胞的組成比較復(fù)雜，可先分離出理化性質(zhì)相近的細(xì)胞。如根據(jù)密度差，用低速冷凍離心機(jī)等密度區(qū)帶離心把血細(xì)胞分成兩層，上層含單核白細(xì)胞和嗜堿細(xì)胞等，下層含紅細(xì)胞和粒細(xì)胞。也可以用低速冷凍離心機(jī)差速離心進(jìn)行粗分離。有些實(shí)驗(yàn)僅作粗分離就可以滿足要求。
第二步，把粗分離后的細(xì)胞用低速冷凍離心機(jī)速率區(qū)帶離心、等密度區(qū)帶離心或淘洗離心進(jìn)一步進(jìn)行分離，把沉降系數(shù)和密度差異較大的細(xì)胞分開。
第三步，精分離。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模捎酶叻直媛实姆蛛x方法，如長梯度柱可使細(xì)胞亞群和不同周期的細(xì)胞進(jìn)一步得到分離。
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