植物花青素的微生物或/和生物酶提取方法,其特征在于它是由下列步驟組成的:
一、原材料預(yù)處理:新鮮含植物花青素的原材料,如葡萄皮、胡蘿卜、藍(lán)靛果,進(jìn)行分類→粉碎→食用軟水浸泡吸水→冰凍破壞植物組織細(xì)胞壁→加熱解凍→壓榨→過(guò)濾制汁備用
(1)→殘?jiān)m當(dāng)加水→浸泡攪拌→壓榨→過(guò)濾制汁備用
二、將上述壓榨過(guò)濾水溶液(1)和(2)合在一起,并將其水溫調(diào)節(jié)到下述降解微生物或/和生物酶的最適范圍。
三、將上述產(chǎn)物以可裂解花色苷糖苷鍵、降解碳水化合物的微生物或/和生物酶進(jìn)行生物降解,先低速攪拌,離心機(jī)設(shè)置100-600轉(zhuǎn)/分,后靜置,使含花青素的花色苷降解為陽(yáng)離子花青素。
具體可用人體腸道菌的乳酸菌和雙歧桿菌等或黑曲霉菌再加上β-葡萄糖苷酶、苦杏仁苷酶、轉(zhuǎn)化糖酶、麥芽糖苷酶、β-糖苷酶、果膠裂解酶中的一種或幾種復(fù)配協(xié)同增效。
裂解和降解時(shí)間10-24小時(shí),溫度25℃-40℃、PH2.5-6.9。
以上各種酶可用淀粉底物吸附沉淀回收再利用。
此步降解前需要先用微生物或/和生物酶降解蛋白質(zhì)。
四、將上述產(chǎn)物再加入相對(duì)于陽(yáng)離子花青素稍微過(guò)量的陰離子表面活性劑,如十二烷基硫酸銨(C12H25OSO↓[3]NH4),以中速攪拌,臺(tái)式低速離心機(jī)設(shè)置600-1400轉(zhuǎn)/分,使之充分反應(yīng)后靜置,使陽(yáng)離子花青素大多被化合沉淀為止。此步反應(yīng)最好輔以0℃以上的較低的溫度,這有利于反應(yīng)物的快速完全沉淀。
五、取出上述含水化合物進(jìn)行微生物降解,可加入少量無(wú)菌飲用水,在先低速攪拌后靜置中進(jìn)行,攪拌速度100轉(zhuǎn)/分左右,使所加入的陰離子表面活性劑被微生物降解,恢復(fù)花青素的陽(yáng)離子活性和水溶性。
具體可用假單孢菌屬、無(wú)色桿菌屬、節(jié)桿菌屬、微球菌屬、諾卡氏菌屬、不動(dòng)桿菌屬、短桿菌屬、棒桿菌屬、黃桿菌屬這些微生物中的一種或幾種的組合進(jìn)行生物降解。
降解時(shí)間10-24小時(shí),降解溫度20℃-40℃,PH3-8。
六、將上述降解產(chǎn)物加熱干燥殺菌,干燥溫度70℃-100℃,得陽(yáng)離子花青素產(chǎn)品。
七、制取高純度醫(yī)藥用陽(yáng)離子花青素產(chǎn)品時(shí),可將上述方法所得花青素產(chǎn)品用蒸餾水或食用乙醇溶解,使失活蛋白質(zhì)殘?bào)w沉淀析出。
八、要制得高純度的陽(yáng)離子花青素干品,還需將上述花青素溶液進(jìn)一步蒸發(fā)濃縮干燥。