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勻漿制備：
　　鼠肝12克加入0.25M蔗糖與5mM Tris-HCL (PH7.4)共45ml用"概論"中建議的勻漿設(shè)備與方法制備成勻漿待用。

鼠肝勻漿的差分分離程序
該實驗流程中
沉Ⅰ：細胞核、質(zhì)膜大片斷，重線粒體，少量未破碎細胞及極少量沉Ⅱ→沉Ⅳ的成份
沉Ⅱ：重線粒體、質(zhì)膜片斷，及少量沉Ⅲ→沉Ⅳ成份。
沉Ⅲ：線粒體、溶酶體，高爾基膜，部分粗內(nèi)質(zhì)綱及極少量沉Ⅳ成份
沉Ⅳ：所有的細膜質(zhì)可溶部份。

離心Ⅰ：低速冷凍離心機，50ml管。離Ⅱ，離Ⅲ為高速冷凍離心機8×50ml角轉(zhuǎn)頭。
離Ⅳ為超速機或高速機8×50ml角轉(zhuǎn)頭。

　　ii)從沉Ⅱ中純化線粒體：
　　勻漿保持在200mM甘露醇，50mM蔗糖，1mM EDTA, 10mM Hepes-Naoh (PH7.4)中，全部操作均應(yīng)使勻漿在冰溶中，產(chǎn)生沉Ⅱ后去除上清表面以及離心管壁部的脂肪（這一點很重要）
　　加20ml保持液到沉Ⅱ中稀釋到30ml，3000g×10分再次離心并重復(fù)以上過程二次以上，最后的沉淀保持在10ML保持液中。

　　iii)從沉Ⅳ中部份純化光滑微粒體：
　　保持液為0.25M蔗糖，5mM Tris-Hcl (PH7.4)沉淀中光滑微粒體成松軟狀態(tài)位于緊密狀態(tài)的粗糙微粒體沉淀之上。
小心地倒掉上清Ⅳ后，在沉Ⅳ中加入2~3ml保持液，輕搖，大部份光滑微粒體（沉ⅣA）將分散到清液中，而沉Ⅳ（B）（粗糙微粒體，緊密沉淀）仍在沉降中，倒出沉Ⅳ（A），余下的沉Ⅳ B加入2~3ml保持液即完成。

　　iii)從沉Ⅰ中部份純化質(zhì)膜：
　　保持液用 1mM NaHCO3
　　鼠肝加25ml保持液在研缽中鍾擊15次，仍用1mMNaCHO3稀釋在100ml，攪拌2分鐘并用孔徑力75μm的尼龍布過濾。然后離心得到Ⅰ加5ml 1mM NaHCO3到沉Ⅰ中再放入勻漿器，慢速往復(fù)2~3次。再用1mM NaHCO3稀釋到15ml，用甩平轉(zhuǎn)頭10ml玻璃錐形管，1200g離心10分鐘，不用制動減速到停車，沉淀很明顯由三層組成。輕輕搖動或攪動即可使最上層的線粒體溶入上清液。中間層富含質(zhì)膜，最下層是細胞核。倒去上清加5ml1mM NaHCO3輕搖使中間層進入溶液，注意要盡可能少地擾動最下層核沉淀。將再次倒出的上清液稀釋到15ml并重復(fù)以上離心過程即可進一步純化質(zhì)膜。

　　iv)從上Ⅲ中分離粗糙和光滑微粒體：
　　從已經(jīng)去掉線粒體的上Ⅲ中可以比從沉Ⅳ中更有效地分離粗糙及光滑微粒體，配置溶液
　　0.6M蔗糖，5mM Tris-HCL, (PH8.0)
　　15mM CSCL, 1.3M蔗糖，0.25M蔗糖
　　用角式轉(zhuǎn)頭，10~13ml厚壁PC（聚碳酸脂）離心管，先注入3ml 1.3M蔗糖-5mM Tris-HCL再注入1.5ml 0.6M蔗糖-5mM Tris-HCL從而形成了一個在離心管下部的階梯形密度梯度。在梯度上部注入上Ⅲ直至充滿離心管。100000g×90分鐘。離心后得到二個主要部份：在0.6M蔗糖界面處或稍下一點是光滑微粒體，沉淀是粗糙微粒體。
　　要針筒吸出光滑微粒體。沉淀用三倍空積的5mM Tris-HCL(PH8.0)稀釋后再次離心160000g×30分，得到粗糙微粒體沉淀，再用2-3ml的0.25M蔗糖與5mM Tris-HCL(PH8.0)稀釋即可。